分子熒光光譜分析
利用某些物質(zhì)分子受光照射時(shí)所發(fā)生的熒光的特性和強(qiáng)度,進(jìn)行物質(zhì)的定性分析或定量分析的方法。當(dāng)物質(zhì)分子吸收了特征頻率的光子,就由原來的基態(tài)能級(jí)躍遷至電子激發(fā)態(tài)的各個(gè)不同振動(dòng)能級(jí)。激發(fā)態(tài)分子經(jīng)與周圍分子撞擊而消耗了部分能量,迅速下降至第一電子激發(fā)態(tài)的最低振動(dòng)能級(jí),并停留約10-9秒之后,直接以光的形式釋放出多余的能量 ,下降至電子基態(tài)的各個(gè)不同振動(dòng)能級(jí),此時(shí)所發(fā)射的光即是熒光。產(chǎn)生熒光的第一個(gè)必要條件是該物質(zhì)的分子必須具有能吸收激發(fā)光的結(jié)構(gòu),通常是共軛雙鍵結(jié)構(gòu);第二個(gè)條件是該分子必須具有一定程度的熒光效率,即熒光物質(zhì)吸光后所發(fā)射的熒光量子數(shù)與吸收的激發(fā)光的量子數(shù)的比值。使激發(fā)光的波長和強(qiáng)度保持不變,而讓熒光物質(zhì)所發(fā)出的熒光通過發(fā)射單色器照射于檢測(cè)器上,亦即進(jìn)行掃描,以熒光波長為橫坐標(biāo),以熒光強(qiáng)度為縱坐標(biāo)作圖,即為熒光光譜,又稱熒光發(fā)射光譜。讓不同波長的激發(fā)光激發(fā)熒光物質(zhì)使之發(fā)生熒光,而讓熒光以固定的發(fā)射波長照射到檢測(cè)器上,然后以激發(fā)光波長為橫坐標(biāo),以熒光強(qiáng)度為縱坐標(biāo)所繪制的圖,即為熒光激發(fā)光譜。熒光發(fā)射光譜的形狀與激發(fā)光的波長無關(guān) 。
對(duì)于稀溶液( 吸光度A=εcl≤0.05 )而言,其熒光強(qiáng)度F=2.3jI0εcl。式中j是熒光物質(zhì)的熒光效率;I0為入射光強(qiáng)度;ε為熒光物質(zhì)的摩爾吸光系數(shù),c為熒光物質(zhì)的濃度 ,l為樣品池的厚度。該式表明,在稀溶液(A≤0.05)和I0及l(fā)不變的條件下,熒光強(qiáng)度與該物質(zhì)的濃度成正比。溶液的熒光強(qiáng)度還受到溶劑、溫度、pH值的影響。還會(huì)因熒光物質(zhì)和其他溶質(zhì)分子的相互作用而降低,這種現(xiàn)象稱為熒光猝滅 。 濕度傳感器探頭 , 不銹鋼電熱管 PT100 傳感器 , 鑄鋁加熱器 , 加熱圈 流體電磁閥 ?xml:namespace>
進(jìn)行分子熒光光譜分析的儀器稱熒光分光光度計(jì)。它由5 部分組成:光源;單色器;樣品池;檢測(cè)器;顯示裝置 。
熒光激發(fā)光譜和發(fā)射光譜,可用來鑒定有機(jī)化合物。冷卻至 77K ,可獲得高度分辨的低溫?zé)晒夤庾V,有利于鑒別 。還可采用同步掃描熒光法,及1~4階的導(dǎo)數(shù)熒光光譜和三維光譜等,來鑒別多組分熒光物質(zhì)。
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