1、簡(jiǎn)介
熒光分光光度計(jì);是用于掃描液相熒光標(biāo)記物所發(fā)出的熒光光譜的一種儀器。其能提供包括激發(fā)光譜、發(fā)射光譜以及熒光強(qiáng)度、量子產(chǎn)率、熒光壽命、熒光偏振等許多物理參數(shù),從各個(gè)角度反映了分子的成鍵和結(jié)構(gòu)情況。通過(guò)對(duì)這些參數(shù)的測(cè)定, 不但可以做一般的定量分析, 而且還可以推斷分子在各種環(huán)境下的構(gòu)象變化, 從而闡明分子結(jié)構(gòu)與功能之間的關(guān)系。熒光分光光度計(jì)的激發(fā)波長(zhǎng)掃描范圍一般是190~650nm,發(fā)射波長(zhǎng)掃描范圍是200~800nm??捎糜谝后w、固體樣品(如凝膠條)的光譜掃描。
熒光/發(fā)光酶標(biāo)儀;檢測(cè)模式:熒光及發(fā)光;微孔板類型:6-384孔板,PCR板;讀取速度:動(dòng)力學(xué)檢測(cè)96孔板,<35秒/96孔;波長(zhǎng)范圍:激發(fā)300-650nm,發(fā)射340-700nm(可選配800nm);光源:鹵鎢燈,1000小時(shí)壽命;數(shù)據(jù)讀取模式:頂部讀數(shù),終點(diǎn)法,動(dòng)力學(xué)檢測(cè),孔域掃描(需要配電腦);波長(zhǎng)選擇:深度阻擋干涉濾光片;溫度控制(選配):溫室以上:4度-50度;振蕩:線性振蕩;
2、分類
酶標(biāo)儀按照功能的不同劃分,可以分為(1)光吸收酶標(biāo)儀(可見(jiàn)酶標(biāo)儀,紫外/可見(jiàn)酶標(biāo)儀)(2)熒光酶標(biāo)儀(3)化學(xué)發(fā)光酶標(biāo)儀。
分光光度計(jì)按照波長(zhǎng)及應(yīng)用領(lǐng)域的不同可以分為:(1)可見(jiàn)光分光光度計(jì)(2)紫外分光光度計(jì)(3)紅外分光光度計(jì)(4)熒光分光光度計(jì)(5)原子吸收分光光度計(jì)。
分光光度計(jì)和酶標(biāo)板存在一些不同之處,具體差別體現(xiàn)在以下三個(gè)方面:
(1)盛裝待測(cè)溶液的容器:
分光光度計(jì)用的是比色皿,酶標(biāo)儀使用的是塑料微孔板(酶標(biāo)板)。比色皿只能起到盛裝溶液的作用,每個(gè)比色皿一次只能盛裝一種溶液。酶標(biāo)板常用透明的聚乙烯材料制成,對(duì)抗原抗體有較強(qiáng)的吸附作用,因此用它作為固相載體,酶標(biāo)板通常為48孔或96孔,每個(gè)微孔可以盛裝不同的溶液。
(2)光路的方向:
分光光度計(jì)是水平光路,而酶標(biāo)儀則是垂直光路。由于酶標(biāo)板盛樣本的塑料微孔板是多排多孔的,光線只能垂直穿過(guò),因此酶標(biāo)儀的光束都是垂直通過(guò)待測(cè)溶液和微孔板的,光束既可是從上到下,也可以是從下到上穿過(guò)比色液。垂直光的特點(diǎn)是標(biāo)本吸光度受液體濃縮或稀釋的影響小,不足之處是受被測(cè)樣本液面是否水平、酶標(biāo)板透光性、孔底是否平整等的影響較大。
(3)光路的長(zhǎng)度:
由于光密度(OD值)與吸光系數(shù), 待測(cè)組分的濃度以及光路長(zhǎng)度成正比關(guān)系。
分光光度計(jì)采用的比色杯的寬度通常是1cm,所以光路長(zhǎng)度固定為1cm。因此不同儀器,不同批次測(cè)量的數(shù)據(jù)具有同樣的可比性。
而酶標(biāo)儀采用的是垂直光路, 所以光路的長(zhǎng)度應(yīng)該是液體液面的高度。所以測(cè)得的值受到樣品的體積的影響。
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